Cómo Tomar Medidas Para Corregir El Solucionador De Problemas De PCR De Yale

En esta guía para navegantes, descubriremos algunos relacionados con las posibles causas que podría causar el solucionador de problemas de PCR de Yale, y justo eso, proporcionaremos algunos métodos de solución decentes que puede examinar para deshacerse de este problema de enfoque. .

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Guía de solución de problemas de ADN de la Universidad de Iowa

Guía de solución de problemas del estado del ADN, Nucleics, Inc. Principales problemas: ¡guía excelente!

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  • La guía de solución de problemas de cebadores de la Universidad de Michigan es la justificación perfecta de por qué sus cebadores funcionan básicamente para PCR pero es posible que no funcionen para la secuenciación.

    Guía de solución de problemas de secuencias de University College London (pdf)


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    La guía de ADN Nucleics, Inc. explica casi todos los desafíos comunes. ¡Excelente guía!

    La guía de solución de problemas de cebadores de la Universidad de Michigan es una explicación sensata de por qué sus cebadores funcionan bien para la PCR, pero es posible que no funcionen si se centra en la secuenciación.

    Causas comunes de una reacción de secuenciación de ADN que da como resultado “datos no analizados”

  • “Datos no tomados en cuenta” ocurre cuando, por lo general, el nivel de adiciones de acabado fluorescente no es lo suficientemente bueno para que el disco duro se comunique con las cookies de software que tiene las bases.
  • Muestra de ADN mala, absolutamente buena. Material de intercambio iónico de Qiagen (Tip-20, Tip-100, etc.) Los Qiawell producen habitualmente la mejor plantilla primaria de ADN de plásmido para la mayoría de los investigadores. Se recomienda que no haya etanol residual y luego mer en el ADN molde. Para obtener mucha más información, consulte nuestra hoja informativa de precios de clientes de plantillas de plásmidos.
  • No es una buena cantidad de ADN molde unido. Los plásmidos de doble cadena requieren de 1000 a 1500 plantillas de Ar-DNA normales por reacción. Nos basamos en una especie de cuantificación de cómo funciona la plantilla de ADN por parte del investigador para establecer con éxito las reacciones de reacción. En general, cuanto más precisa sea la dimensión de la concentración de la matriz, más realistas serán los datos (demasiado ADN puede ser tan malo como muy poco).
  • Concentración de imprimación insuficiente. Tenemos cebadores con un foco de 1 µM, que para un mer de 20 mer incluso se compara con aproximadamente 27 ng/µl.
  • Y/o

  • Primer Matrix ciertamente no debe agregarse a la reacción. A veces, una llamada o una plantilla faltan por casualidad en el resultado. Analicemos para reconocer inmediatamente y repetir tales reacciones.
  • Tm

  • primer deseado << 50oC. Todos los primarios deben producir un punto de fusión de -52oC. El punto de fusión de la imprimación solo necesita ser determinado por el paquete principal (Oligo o Primerselect) que funciona mientras tiene la suma del vecino más cercano relacionado para ayudar a los parámetros termodinámicos a calcular una buena tm. Recomendamos que todos los cebadores de secuenciación tengan entre 20 y treinta y tres nucleótidos de longitud.
  • El estilo no contiene una cuerda que sea complementaria a la de los principiantes. Para demostración, los episodios del vector del plásmido pgem no contienen el sitio de inicio T3, sino el sitio SP6.
  • Para las soluciones de PCR, a veces uno de los cebadores que ahora se usan para hacer un suplemento nutricional de PCR no funciona debido a la secuenciación de fluorescencia paso a paso para la amplificación lineal que garantiza la secuenciación de ciclo completo.
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